年6月4日，中国国家食品药品监督管理局审议通过颁布了《生物制品批签发管理办法》；年11月15日，中国国家食品药品监督管理局为切实保障生物制品质量安全，根据“管理办法”的有关规定，进一步加强生物制品批签发管理工作。目前我国市场上销售的血液制品主要为人血白蛋白、人免疫球蛋白（肌注）、静注人免疫球蛋白（pH4）、破伤风人免疫球蛋白、狂犬病人免疫球蛋白、乙型肝炎人免疫球蛋白、人纤维蛋白原、人凝血酶原复合物、人凝血因子Ⅷ等9种血液制品（包括其冻干剂型），但鉴于年首次发现大陆中国公民受到HIV感染，年9月由卫生部、经贸部和海关总署联合下发《关于限制进口血液制品防止AIDS病传入我国的联合通知》，除此之外还有《卫生部关于禁止进口Ⅷ因子制剂等血液制品的通告》、《卫生部关于禁止Ⅷ因子制剂等血液制品的补充通知》，由于这些政策法规的限制，我国的血液制品进口仅限于人血白蛋白。人血白蛋白常用于失血、创伤及烧伤、肝硬化后引起的休克、脑水肿、腹水及防治低蛋白血症的治疗。近年来，随着临床用量的增加，血液原料短缺，导致人血白蛋白供不应求［1］，因此需大量进口。年后，进口人血白蛋白的总量已超过了国产同类产品的总量，因此有必要对进口产品进行全面充分的了解。
本文总结并分析了负责进口血液制品批签发的中国食品药品检定研究院、北京市药品检验所、上海市药品检验所和广东省药品检验所官方公布的人血白蛋白批签发资料，对从中得到进口血液制品生产商的来源及产地信息进行评估，以期为药品监管部门进一步熟悉有关各方面信息提供参考。
～年间人血白蛋白进口总体情况
近年来，随着人血白蛋白临床需求的不断增加，人血白蛋白的进口量不断增大，见图1。
～年间，进口人血白蛋白分别占人血白蛋白批签发总量的46.39％、57.79％、55.59％、58.76％和59.83％。进口人血白蛋白的生产厂商主要集中在几家大型的血液制品生产企业，～年间占批签发总量前4位的进口厂商分别为杰特贝林（CSL）、基立福（Grifols）、百深（Baxter）和奥克特珐玛（Octa-pharma），占进口总量的比例分别为38．72％、22.57％、19.27％和13.49％。年间占批签发总量前4位的进口厂商分别为杰特贝林（CSL）、基立福（Grifols）、百深（Baxter）和奥克特珐玛（Octa-pharma），占进口总量的比例分别为38.72％、22.57％、19.27％和13.49％。
2进口人血白蛋白的生产工艺
自从COHN等［2］发表分馏法以来，该方法及其改进工艺即成为生产商业规模人血白蛋白的主要工艺。冷冻乙醇法分馏的主要原理是利用了血浆蛋白溶解度的不同，在血浆所含的主要蛋白中，人血白蛋白的溶解度最高而等电点最低，因此在整个过程中最后一个被沉淀出来。COHN及其团队共发表了10种蛋白分馏方法，从历史上来讲，欧美厂商使用的人血白蛋白生产工艺大多为COHN的第6法［3］。COHN法的一个主要变种是由KISTLER和NITSC-HMANN［4］在年公开的，此法简化了低温乙醇分馏程序，如仅用滴定法降低pH并混合分馏中间体（如组分IV＝IV-1＋IV-4），并将人血白蛋白产量最大化，且降低乙醇用量。两种方法的对比见表1。
随着近年来生物制药工艺及设备的快速发展，在血液制品的生产工艺中越来越多的应用到色谱法。虽然目前色谱法只是作为低温乙醇分馏工艺的一个补充，但其发展已很成熟，可代替整套分馏工艺，可以预见未来生产工艺的主流会是色谱法。联邦血清实验室（CSL）即在CURLING等［5］创始的方法基础上开发了一套色谱法工艺，该套工艺中包含1个阴离子交换层析步骤、1个阳离子交换层析步骤、1次超滤和1个凝胶过滤步骤。采用一整套多循环层析法方案对批量为kg的血浆进行处理，包括24个离子交换循环和30个凝胶过滤循环，在自动化的辅助下进行复杂的多层析柱循环，将直列式缓冲液稀释系统和自动化色谱仪联合应用，并在封闭系统中进行洗脱，得到的产品经巴斯德法处理后，纯度很高，且聚体含量很低［6-7］。
在病毒安全性方面，人血白蛋白的生产中采用巴斯德消毒法进行病毒灭活，其工艺条件是以N-乙酰色氨酸或辛酸盐作为稳定剂，将人血白蛋白溶液加热至60℃保持10h。该方法能有效灭活脂包膜病毒［如人类免疫缺陷病毒（HIV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、西尼罗病毒（WNV）］和无脂包膜病毒［如甲型肝炎病毒（HAV）、细小病毒B19］。欧洲药典（EP）和美国药典（USP）均要求对灌装好的人血白蛋白成品采用巴斯德法进行终端病毒灭活。
3进口人血白蛋白原料血浆的采集及质量控制
影响进口人血白蛋白质量的另一关键就是原料血浆的采集以及质量控制。原料血浆的来源有2条途径：一是献血者捐献的全血，在提取出全血内细胞成分后剩下的血浆，即回收血浆（recoveredplasma），可进一步用作血浆蛋白制品生产的原料；二是通过单采血浆技术（plasmapheresis）［8］。需要注意的是，我国明令禁止将全血分离的回收血浆用于血液制品生产。
3．1美国的原料血浆采集及管理美国是世界上唯一一个真正意义上在全血、血浆和血液制品供应方面完全自给自足的国家。美国的原料血浆采集量＞万升/年（未含回收血浆），为全球原料血浆采集量最多的国家，年原料血浆采集量已达万升（含单采血浆万升，回收血浆万升），占同期世界采浆量63％多［9］。其中自身消耗的原料血浆仅占其年采集量的1/3，另外2/3的富裕部分则以原料血浆、中间体和成品的形式出口其他国家［9］。美国有多个经政府批准建立的商业性血浆采集站或采集点，遍布美国各州［10］，其中很多属于跨国大型血浆分离企业，如CSLBehring下属的ZLBPlasma公司在美国有62个血浆采集站，Baxter公司有65个，Talecris公司有55个，此类浆站在美国占大多数。
原料血浆的质量控制方面，招募和筛选健康、合格的献浆者是保证血浆制品质量和安全最为关键的环节。美国FDA就献浆者的身份识别、筛选和血浆采集程序制定了详细的规定，并对血浆采集机构进行不定期检查［11-13］。对合格献浆者的一般要求是：年龄18～65岁，体重≥磅（50kg），健康状态良好，有合法的身份证明（如驾照、学生证和现役军人证等）及社会安全号，提供现居住证明是居住在血浆采集站服务范围内地址（距血浆站一般≤英里以及未曾被列入过永久拒绝名册）。符合这些条件者由执业医师详询献浆者的既往病史，排除传染病并问明药物过敏等情况，进而对其进行全面的体格检查，包括体重、脉搏、血压、体温等一般指征，以及头颈胸腹脏器和淋巴结检查，排除心血管和急慢性呼吸系统等疾病；最后进行血液化验检查，包括Hb、血浆蛋白、HBsAg、抗HIV、抗HCV和梅毒等，要求Hb≥g/L、血浆蛋白≥60g/L、病原体检查均为阴性。通过以上所有检查者即可参加捐献血浆［14-15］。
3．2欧洲的原料血浆采集及管理大多数欧洲国家在全血供应上均能做到自给自足，但用于生产血浆蛋白制品的原料血浆，仅有少数国家能满足本国的需求，大多数国家均需进口原料血浆或通过直接进口血浆蛋白制品的方式加以补充。因此，多数欧洲的商业性血浆蛋白制品企业每年均从美国购入大量原料血浆或血浆中间体［9］。在欧洲已通过IQPP认证的血浆采集中心有27个，均属PPTA成员公司，年参加供浆的人次达到万（非PPTA成员公司未统计在内）［16］。欧盟委员会对血浆采集拟定了严格的监督管理条例，推荐每7d内血浆采集≤2次，每次间隔至少2d，每次单采血浆量≤mL（不含抗凝剂），全年采浆量≤15L［17-20］。具体到各个国家，德国血浆采集量名列欧洲第一，从年起年采浆量即达万升，年为．5万升，年达．9万升，平均每0人年献血浆量20．9L。德国政府规定，全年供血浆≤25L/人，≤mL/次（不含抗凝剂），每年供血浆≤40次/人。德国有50多个血浆采集站，属IQPP验证的20个（其中ZLBPlasma公司有8个）。而奥地利是每年可采≤35L/人，每2周≤3次/人，全年≤50次/人。奥地利有7个IQPP验证的血浆采集站（Baxter公司6个）［9，21］。
法国的血液采集机构下设18个血液采集中心和个采血点。法国的血浆蛋白制品工厂LFB除加工国内来源的血浆外，也协议加工来自比利时、卢森堡、巴西和摩洛哥的血浆。挪威的采供血由全国85医院所属的血液库进行，年采血浆约4万升，其中1万升用作新鲜冷冻血浆用品，另3万升运至Octapharma公司（奥地利）协议加工。捷克在全国80家医院内建有血液采集中心，年采血浆约8万升，其血浆在公开市场上售与Baxter、Grifols和Octa-pharma公司。瑞典、丹麦、比利时、奥地利、意大利和西班牙也都有较丰富的血浆采集。
4主要进口人血白蛋白生产厂商
4．1杰特贝林（CSL）20世纪50年代，澳大利亚为了解决血液制品自给问题，在位于墨尔本帕克维尔的英联邦血清实验室（CommonwealthSerumLabora-tories，CSL）使用澳大利亚红十字会采集的来源于无偿献浆员的血浆进行血浆分离生产，这是一家非盈利性血浆分离厂商。年，英联邦血清实验室被私有化成为CSL有限公司。同年，CSL有限公司在布罗德梅尔新建的血浆分离工厂投入生产，是一家以层析工艺为基础的工厂，产能为25万升。
年，两家欧洲企业，Behringwerke的所有者赫斯特AG以及Armour的拥有者罗纳-普朗克，各自出资50％建立了一家血浆产品合资公司Centeon。年，两家母公司合并为安万特后，该公司更名为安万特贝林，其最终由CSL在年接手，改名为杰特贝林。杰特贝林在美国、瑞士、德国和奥地利均有血浆分离工厂，随后又在美国获得了采浆站。至年止杰特贝林的产能发展［22］见表2。
目前，杰特贝林供应中国市场的生产场地共有3处：位于瑞士伯尔尼的CSLBehringAG、位于德国马尔堡的CSLBehringGmbH和位于美国伊利诺伊州的CSLBehringL．L．C．。CSLBehringAG生产的产品为AlbuRx（中文名为安博灵，规格为20％，50mL/瓶），CSLBehringGmbH生产的产品为Behring［中文名为贝格，规格为10g（20％，50mL）/瓶］，CSLBeh-ringL．L．C．生产的产品为Albuminar［中文名为亚玛，规格为10g（20％，50mL）/瓶］。其中AlbuRx和Albuminar所使用的是改良的K＆N低温乙醇分馏法［4］，Behring使用的则是利凡诺（乳酸依沙吖啶）＋硫酸铵沉淀法［23］，三者均通过终端巴斯德消毒法进行病毒灭活。杰特贝林各生产场地的人血白蛋白批签发量（按10g/瓶计算）历年变化见图2。
4．2基立福（Grifols）年，J．A．GrifolsRoig和他的两个儿子建立了Grifols实验室并开始进行输血研究，年，该实验室在西班牙境内推广了血浆置换技术，从而开始了商业化血浆分离生产［24］。年，基立福也开始跨国扩张，收购了Dade试剂50％的股份。年收购了SeraCare，即现在的Biomat血浆采集中心。年，该公司在美国的24个州拥有64个血浆采集中心。年，基立福从日本绿十字获得了Alpha治疗公司，从而在洛杉矶和巴塞罗那均拥有了血浆分离工厂。基立福的产能发展［22］见表3。
目前，基立福供应中国市场的生产场地主要为两处：位于西班牙巴塞罗那的InstitutoGrifols，S．A．以及位于美国洛杉矶的GrifolsBiologicalsInc．。InstitutoGrifols，S．A．生产的人血白蛋白规格为10g（20％，50mL）/瓶，GrifolsBiologicalsInc．生产的产品为Albutein［规格为10g（20％，50mL）/瓶和12．5g（25％，50mL）/瓶］。基立福各生产场地的人血白蛋白批签发量（按10g/瓶计算）历年变化见图3。
4．3百深（Baxter）百深建立于年，最初是一个生产临床用静注溶液的企业。年，百深收购了Hyland实验室，后者在战争期间参与了冻干血浆的制造，年还在加州的洛杉矶建造了一座17．7万平方英尺的工厂，从而开始了超免疫球蛋白、白蛋白和多种血库、凝血类及化学检测产品的生产。百深在年接手了奥地利血浆分离厂家ImmunoAG在美国和欧洲的主要血浆分离工厂以及在两大洲的主要血浆置换中心，还在比利时莱希纳运营着一家工厂。至年止百深的产能发展［22］见表4。
目前，百深在中国销售的人血白蛋白主要产自3处：位于奥地利维也纳的BaxterAG、位于美国洛杉矶的BaxterHealthcareCorporation以及位于美国伊利诺伊州的BaxterHealthcareCorporationDrugDeliveryDivision。BaxterAG生产的产品规格为10g（20％，50mL）/瓶，BaxterHealthcareCorporation生产的产品为Buminate（规格为5％，mL/瓶），BaxterHealthcareCorporationDrugDeliveryDivision生产的产品规格为20％，50mL/袋和25％，50mL/袋。百深各生产场地的人血白蛋白批签发量（按10g/瓶计算）历年变化见图4。
4．4奥克特珐玛（Octapharma）Octapharma是一家成立于年的私人公司，最初致力于凝血因子Ⅷ产品。年，Octapharma获得了一家位于维也纳的生产工厂。年，Octapharma接手了LFB（法兰西血浆分离和生物技术实验室）在斯特拉斯堡的分离中心；由于其和德国红十字会（DRK）的长期合作，Octapharma先后接手了DRK在斯普林格／汉诺威的血浆分离工厂。年，公司收购了Biovi-trum，在此1年后，Octapharma收购了墨西哥血浆分离企业ProbifasaSAdeCV。Octapharma的产能发展历程［22］见表5。
目前，Octapharma供应中国市场的人血白蛋白主要产地为以下两处：位于奥地利维也纳的Octap-harmaPharmazeutikaProduktionsGmbH以及位于瑞典斯德哥尔摩的OctapharmaAB。两处生产的人血白蛋白产品均有10g（20％，50mL／瓶和12.5g（25％，50mL）／瓶两个规格。奥克特珐玛各生产场地的人血白蛋白批签发量（按10g／瓶计算）历年变化见图5。
5讨论
年底，国家卫生行政主管部门提出了在“十二五”期间（～年）实施血液制品“倍增”计划的设想。进入“十二五”以来，我国血液制品供应总量与品种数均有所上升，与年相比，年的血液制品供应总量和品种数分别增长了70.65％和37.50％。但国产血液制品要满足国内的临床需求，差距依然很大，原因主要是血浆供应量的绝对不足以及国内血浆分离产业对原料血浆的综合利用率相对较低。
尽管国产血液制品远不能满足临床需求，出于对血液制品病毒安全性风险的考虑，对于血液制品的进口国家仍持非常谨慎的态度，目前允许进口的血液制品只有人血白蛋白。
从人血白蛋白的质量控制上而言，自COHN总结确立了以低温乙醇分离为基础的一整套血浆分离生产工艺后，经KISTLER和NITSCHMANN等的一系列改进，已作为世界范围内的人血白蛋白主流生产工艺被广泛应用了半个多世纪，生产的产品质量得到了长期而广泛的应用数据支持。
人血白蛋白能成为唯一被允许进口的血液制品，最大的原因在于其在血液制品中最为可靠的病毒安全性。根据欧洲药典和美国药典的相关规定，在人血白蛋白灌装好后，需采用巴斯德法进行终端病毒灭活，该法可有效灭活包括HIV、HBV和HCV在内的脂包膜病毒以及包括HAV和细小病毒B19在内的无脂包膜病毒。因此，产地为欧洲和美国的人血白蛋白制品基本上均能满足病毒安全性要求。
由于历史原因，在世界范围内血液制品的生产企业均为政府乃至军队机构管理或代管，盈利性的血液制品生产厂商并不多见。随着血液制品逐渐转为民用以及随之而来的血浆分离产业的发展，私人经营的盈利性血浆分离生产商开始成为产业主导，并在二十世纪末开始了跨国企业大规模并购，最终形成了以杰特贝林、百深、基立福和奥克特珐玛等几家为行业主导的商业性血浆分离厂商。至年，这几家厂商的血浆总分离量达到了吨，占商业性血浆分离总量的75％。这在我国的进口人血白蛋白批签发记录中也得到了体现。
考虑到这些大型的跨国血浆分离生产商在扩张过程中吸收了大量位于世界不同范围的血浆分离工厂，因而即使是同一企业生产的相同规格的产品，也有可能是几处完全不同的生产场地生产的，相应的原料血浆来源、血浆分离生产工艺可能会有很大的差异，有些直接影响到产品的质量乃至风险控制。如杰特贝林名下位于澳大利亚的CSLBioplasma，主要采用色谱法对血浆进行分离，在原液阶段进行巴斯德法病毒灭活，而非在制剂最终灌装之后，这与欧洲药典及美国药典要求有所不同［6，25］。因此，了解进口人血白蛋白生产商的发展以及与此相关的包括生产场地、产能的具体情况，有助于监管部门加深对相关产品的质量及风险控制的了解。
原料血浆的采集及管理是影响人血白蛋白质量及安全性控制的重要因素，由于美国在原料血浆采集量上的巨大优势，大部分的跨国血浆分离企业均在美国设有血浆分离工厂，以便就近使用美国的原料血浆资源。本文中4家进口人血白蛋白的最主要厂商，除了奥克特珐玛之外，均有来自美国血浆分离工厂的产品。而在欧洲范围内，由于欧盟内部不同国家对于采浆的不同法规，采浆规模以及管理也有微小差别，相对而言，德国及奥地利是欧洲血浆采集量最大的地区，因此进口人血白蛋白中也有不少产自德奥地区的工厂。除此之外需要注意的是，有些企业如奥克特珐玛还会接受来自周边国家的商业性市售血浆，监管者应注意其具体来源与管理细节。由于我国不允许将全血及其分离产物用于血液制品生产，这条法规也同样适用于进口人血白蛋白的管理。
参考文献
［1］CHENL，YANGM，ZHOUY．Investigationandanalysisontheclinicalapplicationofhumanalbumin［J］．JClinMed，，3（22）：-，．（inChinese）陈玲，杨明，周玥．人血白蛋白的临床应用调查与分析［J］．临床医药文献杂志，，3（22）：，．
［2］COHNEJ，MCMEEKINTL，ONCLEYJL，etal．Preparationandpropertiesofserumandplasmaproteins．I．SizeandchargeofproteinsseparatinguponequilibrationacrossmembraneswithammoniumsulfatesolutionsofcontrolledpH，ionicstrengthandtemperature［J］．JAmChemSoc，，62（7）：-．
［3］COHNEJ，STRONGLE．
Preparationandpropertiesofserumandplasmaproteins．IV．Asystemfortheseparationintofrac-tionsoftheproteinandlipoprotein
本文编辑：佚名
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